1. 倒置荧光显微镜使用
倒置显微镜产品具有预定心相差环与系统相差环供用户选用,霍夫曼相衬法能看到透明组织浮雕般的图像。还可以加配荧光附件,显微操作仪,摄影系统等附件。随着荧光技术的不断发展,光激发和其操作方法已经日益普及了。倒置显微镜产品具有较高的信噪比,可以有效的检测到微弱的荧光信号。是广大科学研究者观察细胞实验最理想的选择。
倒置显微镜就是指物镜与照明系统颠倒,物镜在下,物体在上来进行观察的光学显微镜。大致可分为生物倒置显微镜、金相倒置显微镜、偏光倒置显微镜、荧光倒置显微镜等。多应用于医疗卫生单位、高等院校、研究所等对微生物、细胞、细菌、组织培养、悬浮提、沉淀物等的观察以及细菌的繁殖分裂等领域。
倒置显微镜的优点在于容易制样(只需观察面磨平),载物台上方空间大,对于大样品的研究分析有着明显的优势,倒置生物显微镜的应用,对于培养皿中各细胞以及微生物的分裂等有着极其重要的意义。倒置显微镜的自由度大于正置显微镜。
2. 倒置显微镜怎么看荧光
1、用窗帘遮蔽光线,关闭房间内的电灯,除去荧光显微镜的防尘罩,确保荧光显微镜灯室通风良好、无遮盖。装上汞灯灯箱,并转动灯箱卡圈上的拨杆,将灯箱与镜臂连接。
2、将汞灯灯箱的电源插头插入荧光电源箱后的插座,再将荧光电源箱的插头插入220V外接电源。
3、打开荧光显微镜电源开关,电压表显示出电源电压,如电源电压波动不大于额定电压值的5%,即可按下启动开关点燃汞灯,如因天气太冷或电压不稳定等原因,一次启动未点燃汞灯,可以多按几次。待超高压汞灯弧光达到稳定状态并达到Zda发光效率,即可开始工作。
4、灯泡的调中:
①任选一块标本放在荧光显微镜载物台上。
②转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移出光路,转动滤色片组转换手轮,将紫光(V)或蓝光(B)或绿光(G)激发滤色片组转入光路,并将25荧光物镜转入光路。
③调节粗微调手轮,将标本像调焦清晰。
④前后推动垂直照明器右边的聚光镜调焦推杆,使视场光栏成像清晰,转动视场光栏拨杆将视场光栏收小,调节视场光栏调中螺钉使视场光栏居中,然后再将视场光栏开至Zda。
⑤转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移入光路,前后调节灯箱上的聚光镜拨杆,使汞灯的弧光在视场内成像清晰。
⑥调整灯箱上的灯泡水平调节螺钉和垂直调节螺钉,使汞灯的弧光居中。
⑦调整反光镜水平调节螺钉和垂直调节螺钉,使光源的反射像与汞灯的弧光分开。
⑧转动聚光镜旋钮把聚光镜移出光路,此时视场照明均匀。
5、荧光观察:
①将荧光染色标本放到荧光显微镜载物台上。
②将10x平场物镜或25x荧光物镜转入光路,调节载物台纵横移动手轮,将标本移入光路。
③转动滤光片转换拨轮,将荧光染色标本所需要的激发滤光片组转入光路。激发滤光片组编号刻在滤片组转换拨轮上。滤光片选择正确与否,是荧光显微镜能否得到正确应用的关键。选用滤光片时,必须遵守斯托克斯定律:激发滤光片的透射波长<双色束分离器的透射波长<阻断滤光片的透射波长。
④调节粗调手轮,当看清荧光图像轮廓后,再用微调手轮调焦,直至看到清晰的荧光图像。
⑤当需要得到较强的荧光图像时,可转动聚光镜旋钮把聚光镜移入光路,可获得较明亮的荧光图像。
⑥当需要使用40x或100x荧光物镜观察时,应在标本和物镜间加上甘油,油中不能有影响观察的小泡或杂质。使用时可使甘油慢慢浸润一会儿,然后轻轻左右来回转动物镜转换器以排除气泡。
6、荧光显微摄影
由于荧光图像一般均较明场观察暗得多,所以进行荧光显微摄影需要较长的曝光时间,在曝光时应注意避免荧光显微镜震动。为了缩短曝光时间,可选择倍率较低的摄影目镜或感光度较高的摄影胶片如ASA200以上或DIN24以上。
荧光显微镜摄影技术对于记录荧光图像十分必要,由于荧光很易褪色减弱,要即时摄影记录结果。方法与普通显微摄影技术基本相同。因紫外光对荧光猝灭作用大,如FITC的标记物,在紫外光下照射30s,荧光亮度降低50%。所以,曝光速度太慢,就不能将荧光图像拍摄下来。一般研究型荧光显微镜都有半自动或全自动显微摄影系统装置。
7、荧光图像的记录方法
荧光显微镜所看到的荧光图像,一是具有形态学特征,二是具有荧光的颜色和亮度,在判断结果时,必须将二者结合起来综合判断。结果记录根据主观指标,即凭工作者目力观察。作为一般定性观察,基本上是可靠的。
8、荧光显微镜使用结束,关闭所有电源,做好镜头和载物台的清洁工作,待灯室冷却至室温后,用防尘罩盖好显微镜,并做好使用记录。
荧光显微镜使用注意事项
1、严格按照荧光显微镜说明书要求进行操作,不要随意改变程序。
2、荧光显微镜应在暗室中进行检查。进入暗室后,接上电源,点燃超高压汞灯5~15min,待光源发出强光稳定后,眼睛完全适应暗室,再开始观察标本。
3、防止紫外线对眼睛的损害,在调整光源时应戴上防护眼镜。
4、检查时间每次以1~2h为宜,超过90min,超高压汞灯发光强度逐渐下降,荧光减弱;标本受紫外线照射3~5min后,荧光也明显减弱;所以,Z多不得超过2~3h。
5、荧光显微镜光源寿命有限,标本应集中检查,以节省时间,保护光源。天热时,应加电扇散热降温,新换灯泡应从开始就记录使用时间。灯熄灭后欲再用时,须待灯泡充分冷却后才能点燃。一天中应避免数次点燃光源。
6、标本染色后立即观察,因时间久了荧光会逐渐减弱。若将标本放在聚乙烯塑料袋中保存,可延缓荧光减弱时间,防止封裱剂蒸发。
7、荧光亮度的判断标准:一般分为四级,即“-”表示无或可见微弱荧光。“+”表示仅能见明确可见的荧光。“++”表示可见有明亮的荧光。“+++”表示可见耀眼的荧光。
3. 倒置荧光显微镜使用寿命
显微镜属于精密仪器,随意拿来拿去,从大角度来说是:容易掉落摔坏.从小的角度来说是:拿不稳定,容易产生晃动,使构件产生轻微松动,最后使显微镜精度降低,或者使显微镜使用寿命缩短
4. 倒置荧光显微镜怎么调荧光
一、原理不同
1、荧光显微镜:是以紫外线为光源, 用以照射被检物体, 使之发出荧光, 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。
2、激光共聚焦显微镜:在荧光显微镜成象的基础上加装激光扫描装置,使用紫外光或可见光激发荧光探针。
二、特点不同
1、荧光显微镜:用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另有一些物质本身虽不能发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染色后,经紫外线照射亦可发荧光。
2、激光共聚焦显微镜:利用计算机进行图象处理,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图象,以及在亚细胞水平上观察诸如Ca2+、pH值、膜电位等生理信号及细胞形态的变化。
5. 倒置荧光显微镜使用注意事项
显微镜的物镜组和目镜组都相当于凸透镜.先说物镜:物镜的物(载玻片)处于物镜的1倍和2倍焦距之间,物镜所成的像是倒立放大实像,处于物镜2倍焦距以外,但在目镜之前.由此可见,显微镜调整清晰后,通过观察物镜离载玻片的距离,就可以得出物镜的大致焦距.也就是说,物镜的焦距大致略小于载玻片到物镜组的组合中心的距离.而且越是放大倍数高的物镜,焦距越短,物镜离载玻片越近.再说目镜:目镜的焦距较长.物镜所成的实像就是目镜的实物,这个实物位于目镜前1倍焦距以内靠近焦点的位置.目镜所成的是正立放大的虚像.因为此前物镜所成的像已经倒了,所以现在正立放大的像对于载物台上的真实物体而言就是倒的.由于镜筒、物镜、目镜固定,所以我们调节镜筒的上下时,实际就是调节物镜所成的倒立放大实像在镜筒中的位置,当镜筒向载物台靠近时,倒立放大实像朝镜筒外移动(即远离物镜的方向),反之相反.当倒立放大的实像正落在目镜的观察点时,目镜才能成像清晰.
6. 倒置荧光显微镜使用说明
观察显微镜时,所看到的明亮的原形范围叫视场,它的大小,是由目镜里的视场光阑决定的。视场直径也称视场宽度,是指在显微镜下看到的圆形视场内所能容纳被检物体的实际范围。视场直径愈大,愈便于观察。F=FN/MobF: 视场直径,FN:视场数,Mob:物镜放大率。视场数(Field Number, 简写为FN),标刻在目镜的镜筒外侧。另外倒置荧光的实际视场也和聚光镜调节有关系。
7. 倒置荧光显微镜使用中,什么样品适合荧光观测
有
倒置显微镜inverted microscope组成和普通显微镜一样,只不过物镜与照明系统颠倒,前者在载物台之下,后者在载物台之上,用于观察培养的活细胞,具有相差物镜。
8. 倒置荧光显微镜使用视频
显微镜观察到的像是正立及倒立,都有可能,但通过调整显微镜都可以是正立的,无论是三目显微镜,LJ-CL01 三目拍照测量显微镜LJ-CLP03金相显微镜 LJ-JX2030 拍照测量显微镜,三目视频显微镜 体式显微镜LJ-TS01 体视显微镜还是 LJ-HD200HG,LJ-HD200U,LJ-HD01T高清显微镜, HDMI显微镜 ,CCD影像仪 视频检测仪 视频影像仪 视频影像仪
9. 倒置荧光显微镜使用方法
1.倒置荧光显微镜 由荧光附件与倒置显微镜有机结合构成的,主要用于细胞等活体组织的荧光、相差观察。
2.倒置显微镜多用于无色透明的活体观察,在倒置显微镜的基础上添加一套荧光附件:激光激发块,荧光光源,荧光照明器,激发块切换装置,即可进行倒置荧光观察。
荧光显微镜是用来看荧光标本的,它的波长短,普通显微镜是用普通可见光源看标本的。 原理:荧光镜检术是用短波长的光线照射用荧光素染色过的被检物体,使之受激发后而产生长波长的荧光,然后观察。
优点:检出能力高(放大作用)• 对细胞的刺激小(可以活体染色)• 能进行多重染色用途:• 物体构造的观察——荧光素• 荧光的有无、色调比较进行物质判别——抗体荧光等• 发荧光量的测定对物质定性、定量分析 。
倒置显微镜倒置显微镜inverted microscope组成和普通显微镜一样,只不过物镜与照明系统颠倒,前者在载物台之下,后者在载物台之上,用于观察培养的活细胞,具有相差物镜。
倒置电脑型显微镜倒置显微镜和放大镜起着同样的作用,就是把近处的微小物体成一放大的像,以供人眼观察。只是显微镜比放大镜可以具有更高的放大率而已。 物体位于物镜前方,离开物镜的距离大于物镜的焦距,但小于两倍物镜焦距。所以,它经物镜以后,必然形成一个倒立的放大的实像A'B'。 A'B'靠近F2的位置上。再经目镜放大为虚像A''B''后供眼睛观察。目镜的作用与放大镜一样。所不同的只是眼睛通过目镜所看到的不是物体本身,而是物体被物镜所成的已经放大了一次的像。