1. 柱塞泵 隔膜泵
答:个人认为选隔膜泵。
柱塞泵是将直流电动机带动柱塞复运动将涂料吸入,加压后排出,由于其柱塞裸露,且柱塞在涂料中工作,在涂料研磨作用下柱塞磨损非常快,一旦配备口径较大的喷嘴,其柱塞往复频率提高,加剧柱塞的磨损,机器寿命短。而更换柱塞价格非常昂贵,如果电压不正常也将直接导致工作直流电的不正常。另外,由于大幅来回往复运动,柱塞泵的工作脉动很大,使得喷涂不稳定,涂料喷上的墙面平整度就不够好。
2. 层析柱加压泵
装柱子(添硅胶)时,有两种方法:即湿法装柱和干法装柱,二者各有优劣。不论干法还是湿法,硅胶(固定相)的上表面一定要平整,并且硅胶(固定相)的高度一般为15cm左右,太短了可能分离效果不好,太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。
湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后,再填入柱子中,然后再加压用淋洗剂"走柱子",本法最大的优点是一般柱子装的比较结实,没有气泡。
干法装柱则是直接往柱子里填入硅胶,然后再轻轻敲打柱子两侧,至硅胶界面不再下降为止,然后再填入硅胶至合适高度,最后再用油泵直接抽,这样就会使得柱子装的很结实。接着是用淋洗剂"走柱子",一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。通常上面加压,下面再用油泵抽,这样可以加快速度。干法装柱较方便,但最大的缺陷在于"走柱子"时,由于溶剂和硅胶之间的吸附放热(可以用手摸柱子明显感觉到),容易产生气泡,这一点在使用低沸点的淋洗剂时如乙醚,二氯甲烷更为明显。虽然产生的气泡在加压的情况下不易察觉,但是,一旦撤去压力,如在上样、加溶剂等操作的时候,气泡就会释放出来,严重时,整个柱子变花,样品不可能平整地通过,当然也就谈不上分离了。解决的办法是:第一、硅胶一定要天结实;第二、 一定要用较多的溶剂"走柱子",一定要到柱子的下端不再发烫,恢复到室温后再撤去压力。
也有介绍在硅胶的最上层填上一小层石英砂,防止添加溶剂的时候,使得样品层不再整齐。但我的感觉是如果小心上样,添加溶剂,则没有这个必要。
上样也有干法和湿法之分:干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后,在加入少量硅胶,拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦,但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂(最好就是展开剂,如果展开剂的溶解度不好,则可以用一极性较大的溶剂,但必须少量)将样品溶解后,再用胶头滴管转移得到的溶液,沿着层析柱内壁均匀加入。然后用少量 芗 洗涤后,再加入。湿法较方便,熟手一般采用此法 柱层析和TLC是有机化学工作者必须下苦功夫的两项实验技术。这两项技术掌握与否,对于提高实验的效率至关重要。常见的例子是:在柱层析时,由于层析柱中的硅胶填料装得不均匀(没有填严实),使得柱子在淋洗过程中就因为出现太多气泡变花,导致分离效果不好。更常见的例子是:层析柱虽然装得不错,但是由于淋洗剂选择不恰当,结果导致几十毫克产品,用了几百毫升淋洗剂都还没有完全分离。分离同样的东西,熟手可能只需要半个小时,而一个层析技术不过关的人可能半天都不能得到纯品。由此可见,这两项技术掌握与否,对于提高工作效率,减轻工作量,减少有机溶剂的使用,从而对身心健康和环境保护都有明显的作用。
柱层析关键在于柱子是否装好和淋洗剂是否选择恰当。而淋洗剂的选择则是通过TLC确定。这里要指出的一点是:TLC的作用除了跟踪反应进程,上样完毕后,接着即用淋洗剂淋洗。淋洗剂一般采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。由于层析柱和薄板的不同,即使两者使用的硅胶都相同,但是在把TLC分析得到的展开剂用在柱层析时,也显得极性偏大,所以要稀释一倍,但又不能稀 释太多,否则成了靠扩散作用来分离,效果也不会好。
检测试剂和原料纯度外,一个重要的用途就是为柱层析选择适当的淋洗剂。
3. 蠕动泵过滤
通过对软管位于泵头圆弧外的排出端和吸入端施加不同的力度进行拉伸来改变软管的拉紧程度,调节位于泵头圆弧内的软管的内径,以改变“单位体积”的方式达到对蠕动泵的流量进行微调的目的。
4. 恒流泵与层析柱连接
一、离子交换柱安装方法
1、装柱
将层析柱垂直装好,关闭柱底出口,在柱内注入约1cm高的柠檬酸缓冲液。将经处理已成钠型的树脂置于烧杯中,加进1倍体积的柠棣酸缓冲液,搅成悬浮状沿柱内壁细心地把柱灌清。倒时不要太快,以免产生泡沫。待树脂在柱底逐渐沉积至约lcm高时,用极管吸去柱内上层所出现的清液,慢要打开柱底出口,继续加注树脂悬液直至柱体装到8cm高度为上。
在装柱时要避免生柱内液体流干面使装柱失败,另外树脂悬浮液的温度耍相对恒定(特别是对于采用高温法)。装好的柱体应该没有纹路,没有节痕,没有气泡,杜项衣而平整而均匀。如此,方可投入使用,否则须要重装,
2、平衡
柱装好后接上调好流速的恒流采或恒压洗脱究,四柠橡酸缓冲洗脱液以24m1/hr的流速平衡,直到流出液的PH与洗脱液的PH相司为上,这人约击要2-3倍床体积。
3、加样与洗脱
移去柱上加液器塞,打开柱底出口,小心使柱内液体流至体表面时即行关闭。用加样吸管吸取0.5ul氨基酸酸混合栏品溶液。沿柱壁小心地加入柱中,加样不要过快,以免冲坏树脂表面,加栏后慢慢打开柱底阀,使液面再与树脂面相齐时关闭,然后再用极管吸取运量洗脱液,如此清洗柱内壁四周2-3次。洗涤后,用缓冲液在柱内加全23cn高的液层,然后接上加液器调好流速(24ml/hr)即开始洗脱。 注意在调节流速时要排除掉恒汽泵或恒压瓶与杜之间连安管内的所有气泡。并且在调节时不要过猛,以免影响层析行为。
4、收集
柱流液可用自部分收集器约收20管。
5、测定
将收集的各管编号后,分别取0.5ml收集液于一洁净的干试管中,加入Iml洗脱缓冲液;0.5mlKCN茚三酮试判,混合后在100C水浴加热25分钟,然后水冷却5-10分钟,加3ml 60%乙醇稀释,摇匀后用72型或721型分光光度计在570nm处比色。测定后以光吸收为纵坐标,收集的管数或ml数为横坐标绘制洗脱由线。
6、再生
对于装好的柱使用几次后需要0. 2N NaOH溶液洗脱,再用燕留水洗至中性后重复使用。对于不知或难以告计层析行为的样品层析时,要采用逐管收集测定跟踪法,以便掌握层析的结果。氨基酸测定一般在1PH左右,在本实验中因缓冲液的PH就为5.3,因此可直接测定。但如果PHI偏差要求太大,则可以加lml、2N, PHS.5醋酸缓冲液,以保注测定条件。
5. 蠕动泵 隔膜泵
答:蠕动泵和哥隔膜泵优缺点如下
蠕动泵是现在许多领域都所运用的一种泵,也是现在市场上比较流行的一种泵。这种泵与隔膜泵相较有许多的优势,给大家详细的介绍下,主要的区别与优势有以下几点:
一:气动隔膜泵需要消耗很大的气源然而蠕动泵却不需要;
二:隔膜泵限制了出品的压力如果超过的时候就会停止工作,蠕动泵的压力很好,这与隔膜泵相经优势很大;
三:隔膜泵清理比较困难,拆卸比较麻烦. 然而蠕动泵拆卸清洗是非常方便的;
四:在输送一些腐蚀性的流量及会出现凝固流量时,隔膜泵非常容易受损坏或发生阻塞;而蠕动泵便宜些,使用寿命也比较长一些,虽然软管是一种消耗品;
五:在精度的控制上面蠕动泵比隔膜泵好许多. 可以的控制及计量;
六:隔膜泵前期购买的费用不多,但是消耗品非常高,与蠕动泵相比也差许多。