1. 荧光显微镜滤光片组成
主要区别
1荧光显微镜.照明方式通常为落射式，即光源通过物镜投射于样品上；
2.光源为紫外光，波长较短，分辨力高于普通显微镜；
3.有两个特殊的滤光片，光源前的用以滤除可见光，目镜和物镜之间的用于滤除紫外线，用以保护人眼。
LW300LFT荧光显微镜也是光学显微镜的一种，主要的区别是二者的激发波长不同。由此决定了荧光显微镜与普通光学显微镜结构和使用方法上的不同。
荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光，通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。
2. 荧光显微镜的滤光片
显微镜物镜和目镜脏了用棉花棒沾上纯酒精擦。
1. 用洗耳球吹去灰尘。
2. 用长纤维的棉花棒沾上纯酒精(100%)。 长纤维是避免短的棉花纤维留在显微镜镜片或者数码摄像头的保护滤光片上。而100%纯酒精的目的是避免擦拭后留下水痕。
3. 甩去多余液体(目的是避免太多液体残留在镜片表面)。
4. 以镜片中心为圆心，同行圆方向将污垢推向镜片的边缘。
5. 如发现有无法去除的脏点，请联系工程师，工程师根据情况采取措施，避免损失镀膜。
3. 荧光显微镜中各种滤光片的作用
显微镜带光源和不带光源的区别:
1.照明方式通常为落射式，即光源通过物镜投射于样品上;
2.光源为紫外光，波长较短，分辨力高于普通显微镜;
3.有两个特殊的滤光片，光源前的用以滤除可见光，目镜和物镜之间的用于滤除紫外线，用以保护人眼。
4. 荧光显微镜滤光块
荧光显微镜(LWD300-38LFT，LW300LFT)的滤光片不止两种。种类有以下几种及其作用:
1. 吸热滤光片吸热滤光片是防止光源光谱中的热辐射线损伤光具组所必需的滤光片。
2.激发光滤光片激发光滤光片可以选择性吸收长波谱线而吸通透紫外线，紫色，蓝色和绿色光线的滤光片为激发滤色片。
3.阻挡滤光片阻挡滤光片是选择性吸收短波谱线和红外线而通透较长波长可视线的滤光片，其功能是使观察都能看到被检物体所激发出来的荧光，同时保护观察都的角膜免遭紫外线伤害4.色光分离滤光片色光分离滤光片是将激发光反射到被检物体上，使被检物体激发出荧光，再将荧光透射到目镜的滤光反射镜。这类滤我片只能用于落射光聚光器中，而透射光荧光显微镜不需要色光分离。5.干涉滤光片干涉滤光片是高性能激发滤光片的一种。它是将数张薄层金属膜叠放在抛光的两张玻璃片之间制成的滤光片。每张薄金属膜的折光系数都不相同，因此照明光源的各种不同波长的谱线在每张金属膜上反复进行反射，使得某些波长的谱线因相消干涉而抵消，另一些波长的谱线相加干涉而得以加强，并透射过去，这样得到透射波谱很窄、半波峰宽度只有6-20nm，透光度可达到60%-70%的滤光片。
5. 荧光显微镜滤光片组成原理
加不同的滤光片.然后把看到的图叠在一起就是双色的了.
6. 荧光显微镜中各种滤色镜的作用
1、用窗帘遮蔽光线，关闭房间内的电灯，除去荧光显微镜的防尘罩，确保荧光显微镜灯室通风良好、无遮盖。装上汞灯灯箱，并转动灯箱卡圈上的拨杆，将灯箱与镜臂连接。
2、将汞灯灯箱的电源插头插入荧光电源箱后的插座，再将荧光电源箱的插头插入220V外接电源。
3、打开荧光显微镜电源开关，电压表显示出电源电压，如电源电压波动不大于额定电压值的5%，即可按下启动开关点燃汞灯，如因天气太冷或电压不稳定等原因，一次启动未点燃汞灯，可以多按几次。待超高压汞灯弧光达到稳定状态并达到Zda发光效率，即可开始工作。
4、灯泡的调中：
①任选一块标本放在荧光显微镜载物台上。
②转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移出光路，转动滤色片组转换手轮，将紫光(V)或蓝光(B)或绿光(G)激发滤色片组转入光路，并将25荧光物镜转入光路。
③调节粗微调手轮，将标本像调焦清晰。
④前后推动垂直照明器右边的聚光镜调焦推杆，使视场光栏成像清晰，转动视场光栏拨杆将视场光栏收小，调节视场光栏调中螺钉使视场光栏居中，然后再将视场光栏开至Zda。
⑤转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移入光路，前后调节灯箱上的聚光镜拨杆，使汞灯的弧光在视场内成像清晰。
⑥调整灯箱上的灯泡水平调节螺钉和垂直调节螺钉，使汞灯的弧光居中。
⑦调整反光镜水平调节螺钉和垂直调节螺钉，使光源的反射像与汞灯的弧光分开。
⑧转动聚光镜旋钮把聚光镜移出光路，此时视场照明均匀。
5、荧光观察：
①将荧光染色标本放到荧光显微镜载物台上。
②将10x平场物镜或25x荧光物镜转入光路，调节载物台纵横移动手轮，将标本移入光路。
③转动滤光片转换拨轮，将荧光染色标本所需要的激发滤光片组转入光路。激发滤光片组编号刻在滤片组转换拨轮上。滤光片选择正确与否，是荧光显微镜能否得到正确应用的关键。选用滤光片时，必须遵守斯托克斯定律：激发滤光片的透射波长<双色束分离器的透射波长<阻断滤光片的透射波长。
④调节粗调手轮，当看清荧光图像轮廓后，再用微调手轮调焦，直至看到清晰的荧光图像。
⑤当需要得到较强的荧光图像时，可转动聚光镜旋钮把聚光镜移入光路，可获得较明亮的荧光图像。
⑥当需要使用40x或100x荧光物镜观察时，应在标本和物镜间加上甘油，油中不能有影响观察的小泡或杂质。使用时可使甘油慢慢浸润一会儿，然后轻轻左右来回转动物镜转换器以排除气泡。
6、荧光显微摄影
由于荧光图像一般均较明场观察暗得多，所以进行荧光显微摄影需要较长的曝光时间，在曝光时应注意避免荧光显微镜震动。为了缩短曝光时间，可选择倍率较低的摄影目镜或感光度较高的摄影胶片如ASA200以上或DIN24以上。
荧光显微镜摄影技术对于记录荧光图像十分必要，由于荧光很易褪色减弱，要即时摄影记录结果。方法与普通显微摄影技术基本相同。因紫外光对荧光猝灭作用大，如FITC的标记物，在紫外光下照射30s，荧光亮度降低50%。所以，曝光速度太慢，就不能将荧光图像拍摄下来。一般研究型荧光显微镜都有半自动或全自动显微摄影系统装置。
7、荧光图像的记录方法
荧光显微镜所看到的荧光图像，一是具有形态学特征，二是具有荧光的颜色和亮度，在判断结果时，必须将二者结合起来综合判断。结果记录根据主观指标，即凭工作者目力观察。作为一般定性观察，基本上是可靠的。
8、荧光显微镜使用结束，关闭所有电源，做好镜头和载物台的清洁工作，待灯室冷却至室温后，用防尘罩盖好显微镜，并做好使用记录。
荧光显微镜使用注意事项
1、严格按照荧光显微镜说明书要求进行操作，不要随意改变程序。
2、荧光显微镜应在暗室中进行检查。进入暗室后，接上电源，点燃超高压汞灯5～15min，待光源发出强光稳定后，眼睛完全适应暗室，再开始观察标本。
3、防止紫外线对眼睛的损害，在调整光源时应戴上防护眼镜。
4、检查时间每次以1～2h为宜，超过90min，超高压汞灯发光强度逐渐下降，荧光减弱;标本受紫外线照射3～5min后，荧光也明显减弱;所以，Z多不得超过2～3h。
5、荧光显微镜光源寿命有限，标本应集中检查，以节省时间，保护光源。天热时，应加电扇散热降温，新换灯泡应从开始就记录使用时间。灯熄灭后欲再用时，须待灯泡充分冷却后才能点燃。一天中应避免数次点燃光源。
6、标本染色后立即观察，因时间久了荧光会逐渐减弱。若将标本放在聚乙烯塑料袋中保存，可延缓荧光减弱时间，防止封裱剂蒸发。
7、荧光亮度的判断标准：一般分为四级，即“-”表示无或可见微弱荧光。“+”表示仅能见明确可见的荧光。“++”表示可见有明亮的荧光。“+++”表示可见耀眼的荧光。