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蛋白质检测原理(蛋白质测定)

来源:www.haichao.net  时间:2023-01-19 14:59   点击:170  编辑:admin   手机版

1. 蛋白质测定

1. 向试管注入2ml的待测组织样液2. 向试管内注入双缩脲试剂A液1ml, 摇匀3. 向试管内注入双缩脲试剂B液4滴, 摇匀4. 观察试管中出现的颜色变化..若出现紫色反应, 这证明含有蛋白质

2. 测定蛋白质浓度的方法

考马斯亮蓝法测定蛋白质含量实验中,使用的水最低要求是蒸馏水,更高精度要求可能会使用双蒸水。因为Bradford检测中要用的试剂配制,标准曲线的制作都要用到水。

3. 食品中蛋白质的测定国标

在我国的规定中,奶粉蛋白质含量的标准是每100kJ奶粉,应该含有蛋白质0.45-0.70g。在标准中,还有一个十分重要的指标,那就是乳清蛋白以及酪蛋白的比例,达到6:4是最佳的状态。

蛋白质是宝宝奶粉中的重要营养元素,必须要达到标准。只有摄入了足够的蛋白质,宝宝身体里才能够生成抗体,而抗体就是保护孩子避免受到感染性疾病侵害的物质。

要是孩子饮用的奶粉中蛋白质不达标的话,宝宝就不能够正常、健康的发育,在严重的时候会出现生长迟缓

4. 蛋白质含量检测方法

GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定

本标准代替GB 5009.5-2010《食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》、GB/T 14489.2-2008《粮油检验 植物油料粗蛋白质的测定》、GB/T 15673-2009《食用菌中粗蛋白含量的测定》、GB/T 5511-2008《谷物和豆类 氮含量测定和粗蛋白质含量计算 凯氏法》、GB/T 9695.11-2008《肉与肉制品 氮含量测定》和GB/T 9823-2008《粮油检验 植物油料饼粕总含氮量的测定》。

本标准规定了食品中蛋白质的测定方法。

本标准第一法和第二法适用于各种食品中蛋白质的测定,第三法适用于蛋白质含量在10g/100g以上的粮食、豆类奶粉、米粉、蛋白质粉等固体试样的测定。

本标准不适用于添加无机含氮物质、有机非蛋白质含氮物质的食品的测定。

5. 蛋白质测定的方法

蛋白质印迹(免疫印迹试验)即Western Blot物、物化免疫遗传用种实验其基本原理通特异性抗体凝胶电泳处理细胞或物组织品进行着色通析着色位置着色深度获特定蛋白质所析细胞或组织表达情况信息

蛋白质印迹由瑞士米歇尔弗雷德希物研究所(Friedrich Miescher Institute)Harry Towbin1979提尼尔·伯奈特(Neal Burnette)于1981所著《析物化》(Analytical Biochemistry)首称Western Blot蛋白免疫印迹(Western Blot)电泳离细胞或组织总蛋白质凝胶转移固相支持物NC膜或PVDF膜用特异性抗体检测某特定抗原种蛋白质检测技术现已广泛应用于基蛋白水平表达研究、抗体性检测疾病早期诊断等面

6. 蛋白质测定时蒸馏应该加入过量氢氧化钠

1、凯氏定氮法

凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收,再以标准盐酸滴定,就可计算出样品中的氮量。

由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是经典的蛋白质定量方法。

优点:可用于所有食品的蛋白质分析中;操作相对比较简单;实验费用较低;结果准确,是一种测定蛋白质的经典方法;用改进方法(微量凯氏定氮法)可测定样品中微量的蛋白质。 

缺点:凯氏定氮法只是一个氧化还原反应,把低价氮氧化并转为氨盐来测定,而不能把高价氮还原为氮盐的形式,所以不可以测出物质中所有价态的氮含量。

7. 蛋白质测定凯氏定氮法

食品中蛋白质的测定方法

本标准适用于各类食品中蛋白质的测定.

1 原理

蛋白质是含氮的有机化合物.食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵.然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数

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