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手指分离器(手性怎么分离)

来源:www.haichao.net  时间:2023-02-11 23:30   点击:90  编辑:admin   手机版

一、手性怎么分离

对映体:互为实物与镜像而不可重叠的一对异构体。如左旋乳酸与右旋乳酸是一对对映体。   对映体具有相同的物理性质(如熔点,沸点,溶解度,折射率,酸性,密度等),热力学性质(如自由能,焓、熵等)和化学性质。除非在手性环境(如手性试剂,手性溶剂)中才表现出差异。对映体对偏振光的作用不同,它们的比旋光度数值相同,但方向相反。等量的左旋体与右旋体的混合物构成外消旋体。 原理:从对映体中分离出单纯一个光学异构体的方法称拆解。最普通的拆解方法是将消旋体与光学活性相反的离子(称拆解剂)作用生成非对映体。被分析样品(气体或液体汽化后的蒸汽)在流速保持一定的惰性气体(成为载气或流动相)的带动下进入填充有固定相的色谱柱,在色谱柱中样品被分离成一个个的单一组分,并以一定的先后次序从色谱柱流出,进入检测器,转变成电信号,再经放大后,由记录器记录下来,在记录纸上得到一组曲线图(称为色谱图),根据色谱峰的峰高或峰面积就可以定量测定样品中各个组分的含量。

二、手性分离的方法

被分析样品(气体或液体汽化后的蒸汽)在流速保持一定的惰性气体(成为载气或流动相)的带动下进入填充有固定相的色谱柱,在色谱柱中样品被分离成一个个的单一组分,并以一定的先后次序从色谱柱流出,进入检测器,转变成电信号,再经放大后,由记录器记录下来,在记录纸上得到一组曲线图(称为色谱图),根据色谱峰的峰高或峰面积就可以定量测定样品中各个组分的含量

三、什么叫手性分离

理论上来讲是没问题的,通常认为手性化合物最难分离,但任然有手性柱可以进行分离。但往往实际情况是:顾此失彼的。为了保证复杂物质中其中两个有效成分分离选用的色谱柱、流动相和分离条件,导致另一些物质无法分离,而保证另一些分离,便又导致这两个无法有效分离。那么仪器厂家和色谱柱厂家便想尽办法革新技术来改变这些情况:

1)各种特殊填料的色谱柱2)各种特殊流动相的液相色谱系统(纯水分离系统,超临界流体系统)

3)特定组分截断循环分离方法(对于分析完成的某些为彻底分离成分切出来再次进入色谱柱分离)

4)液相色谱质谱串联法然而实际情况是,绝大多是的液相色谱分析并不需要得知其中每一个成分的含量,所以只要我们需要的峰能分离开便够了。

四、什么是手性分离技术

HPLC可分为以下六类。

亲和色谱:主要利用样品与固定性之间的亲和性,实现分离。

离子交换色谱:基于固定相与流动相的带电基团发生可逆交换,达到分离目的。离子交换树脂用于分离含有带电离子的样品。对于阴离子,使用阴离子交换树脂;对于阳离子,使用阳离子交换树脂。主要用于分离酸性和碱性化合物。

离子对色谱:在反相色谱的流动相或固定相中加入离子配对剂,与样品中可电离的成分形成“对离子”。常用的离子配对剂有戊烷、己烷、庚烷或辛烷磺酸盐等。

吸附色谱:是利用吸附性不同的原理,根据样品中的组分对固定相的亲和力不同而发生分离。

空间排阻色谱:按样品中的组分的分子大小顺序进行分离。色谱柱是由琼脂糖、葡聚糖、聚丙烯酰胺等软凝胶制成,也可用烷基葡聚糖、聚苯乙烯等半刚性凝胶。

手性色谱:用于分离样品中的光学活性异构体。固定相采用化学键合硅胶。常应用于医药、生物等领域。

五、怎么分离手性化合物

电泳法分离混合蛋白质的基本原理是根据蛋白质的电荷不同即酸碱性质不同分离蛋白质混合物的方法。

电泳:在外电场的作用下,带点颗粒将向着与其电性相反的电极移动,这种现象称为电泳。电泳技术可用于氨基酸、肽、蛋白质和核苷酸等生物分子的分析分离和制备。 区带电泳是由于在支持物上电泳蛋白质混合物被分离为若干区带。

电泳前用缓冲液浸润薄膜或滤纸等支持物或用缓冲液直接配置成凝胶,将待分离的蛋白质样品加在它的一端或中央,支持物的两端与电极连接,通电电泳。电泳完毕,各个组分分布在不同的区域,用显色剂(蛋白质可用考马斯亮蓝或氨基黑等染色)显色后可以显示出各个组分。

氨基酸混合物特别是寡聚核苷酸混合物一次电泳往往不能完全分开。这种情况可以将第一次电泳分开的斑点通过支持介质间的接触印迹转移到第二个支持介质上,旋转90°,进行第二次电泳。这种方法称为双向电泳。

聚丙烯酰胺凝胶电泳:以聚丙烯酰胺凝胶为支持物,一般制成凝胶柱或凝胶板,凝胶是由相连的两部分组成(小的部分是浓缩胶,大的部分为分离胶),这两部分凝胶的浓度、缓冲液组分和离子强度、pH以及电场强度都是不同的,即不连续性。电泳时样品首先在不连续的两相间积聚浓缩而成很薄的起始区带,然后再进行电泳分离。

电泳有三种物理效应:1、样品的浓度效应;2、凝胶对被分离分子的筛选效应;3、一般电泳分离的电荷效应。

毛细管电泳:高效毛细管电泳、毛细管区带电泳、自由溶液毛细管电泳、毛细管电泳,可分离氨基酸、肽、蛋白质、DNA片段和核酸以及多种小分子,也可用于手性化合物的分离。

等点聚焦(IEF)分离蛋白质混合物是在具有pH梯度的介质(如浓蔗糖溶液)中进行。在外电场作用下各种蛋白质将移向并聚焦在等于其等电点的梯度处,并形成一个很窄的区带。

pH梯度制作一般利用两性电解质,它是脂肪族多胺和多羧类的同系物,它们具有相近但不相同的解离常数和等电点。在外电场作用下,自然形成pH梯度。

层析聚焦:根据蛋白质的等电点差异分离蛋白质混合物的柱层析方法。

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