1. 分光光度计测定吸光度
分光光度计对一定浓度吸光物质需设置最大吸收的波长，特定物质的最大吸收波长可以查阅文献后在仪器上设定，测定待测液浓度需作标准曲线，标准曲线吸光度一般在0.2到0.8和浓度呈线性关系。
2. 常见红外光谱吸收峰
有N-H键及C-N键的吸收峰。N-H键的伸缩振动在3300——3500cm-1,伯胺为双峰；仲胺为单峰。C-N键的伸缩振动一般在1190cm-1左右。 T/% σ/（cm-1） N-H伸缩 N-H伸缩 胺的核磁共振谱：由于氮的电负性比碳大， 所以α-碳原子上的质子化学位移在较低场， δ值为2.2-2.9.
3. 紫外光谱吸收峰
紫外可见吸收光谱有两个重要的特征：最大吸收峰位置（λmax）以及最大吸收峰的摩尔吸光系数（κmax）。最大吸收峰所对应的波长代表着化合物在紫外可见光谱中的特征吸收。而其所对应的摩尔吸收系数是定量分析的依据。
4. 光谱吸收峰
3250-3500cm-1一般是-NH，-NH2以及-OH的伸缩振动，当然，如果没有这些基团而在3400有峰说明样品吸潮，这是水峰
2700-3100一般是甲基、亚甲基及次甲基的伸缩振动
2400-2600是铵盐伸缩振动
2200-2300这个位置的吸收峰只有2种，炔基或者氰基，吸收峰强度中等
1650-1750这个位置的吸收峰相当有特点，这是羰基的特征吸收位置，吸收强度大，一般有几个羰基就有几个吸收峰，羰基种类具体要看结构，这个位置是红外中最具特色的吸收峰位置。
5. 紫外光谱特征吸收峰
紫外可见吸收光谱吸收峰是由于价电子的跃迁而产生的。 紫外吸收光谱和可见吸收光谱都属于分子光谱，它们都是由于价电子的跃迁而产生的。
利用物质的分子或离子对紫外和可见光的吸收所产生的紫外可见光谱及吸收程度可以对物质的组成、含量和结构进行分析、测定、推断。
在有机化合物分子中有形成单键的σ电子、有形成双键的π电子、有未成键的孤对n电子。
当分子吸收一定能量的辐射能时，这些电子就会跃迁到较高的能级，此时电子所占的轨道称为反键轨道，而这种电子跃迁同内部的结构有密切的关系。
紫外可见吸收光谱中吸收峰的形状及所在位置是定性、定结构的依据；吸收峰的强度是定量的依据。
6. 分光光度计 吸光度
紫外可见分光光度计的使用方法
第一步：需要能够连接紫外可见分光光度计的电源线，使用的电源需要是具有接地功能的电源。
第二步：以上步骤完成后，需要按下设备电源开关，然后让仪器预热至少20分钟。自检结束后，即可开始测试。
第三步：用紫外-可见分光光度计测试，从测量结果中选择透光率、吸光度和浓度。
第四 步：需要进行波长分析。选择按钮6，根据提示依次进行。
第五步：将相对样品溶液和待测溶液分别倒入比色皿中，然后打开样品盖，将装有溶液的比色皿插入另一个比色皿中。
第 六步：您需要能够将参考溶液拉入光路并按住 OABS/100%T 键。然后显示屏将显示“BLANKING”，直到最终显示 100%T 或 0.000A。
第七步：测试结束，仪器显示100%T或0.000A，即可直接读取透光率和吸光度等参数。
第八步：紫外可见分光光度计使用完毕后关闭电源，取出比色皿清洗干净，用软布和软纸擦拭样品。
7. 分光光度计吸收曲线
在分光光度法中，常常使用标准曲线来表示物质浓度与光谱线强度之间的关系。标准曲线的数学公式是 y = f(x)，其中 x 是物质浓度，y 是光谱线强度。
根据不同的应用场景，分光光度法中使用的标准曲线公式也可能不同。例如，在线性回归分析中，常用的标准曲线公式是 y = a * x + b，其中 a 和 b 是常数。在非线性回归分析中，可能使用指数曲线、双曲线或对数曲线等公式来描述标准曲线。