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超微量分光光度计校准(超微量分光光度仪)

来源:www.haichao.net  时间:2023-01-15 01:06   点击:162  编辑:admin   手机版

1. 超微量分光光度仪

1、打开仪器电源开关,开启比色皿暗箱盖,调节“0”电位器旋纽,使电表指针处于透光率(T)“0”位,预热约20分钟。

2、调节波长(λ)调节旋纽,选择需用的单色光波长。

3、调节灵敏度开关,选择适当的灵敏度。再用调“0”旋纽复校电表透光率“0”位。

4、将比色皿暗箱盖合上,将参比溶液(空白)推入光路,顺时针旋转“100%”电位器调节旋纽使电表指针处于透光率“100%”处。

5、按上述方式连续几次调整透光率“0”及“100”,直至不变,即可进行测定工作。

6、将校准溶液和待测溶液推入光路,读取校准溶液吸光度(A)值。

7、将待测溶液推入光路,读取待测溶液吸光度值。

8、根据校准溶液和待测溶液吸光度值及校准溶液浓度计算待测物浓度。

2. 超微量分光光度仪光程0.03

oma-300氨分析仪。

 操作原理 正如比尔朗母达定律所表示的,某一组分的浓度在某一波长处与其吸光度有直接的比例关系。oma-300,光纤电缆将白光从脉冲光源传送到流通池。在流通池,连续的气流样品在光程内与光相互作用。每种组分都有一个独一无二的光学指纹,在不同的波长处吸收不同数量的光。 穿过样品后,光源离开流通池,再通过光纤回到nova-二代光谱仪。一个分光全息光栅将白光分解为连续的波长,将每个分解后的波长聚焦至二极管阵列上的特定的光二极管上。从氙灯到二极管阵列,这个测量循环瞬间完成,不需要任何移动部件。

3. 超微量分光光度仪测DNA浓度,浓度不合格原因

实时荧光定量PCR不是用来测浓度的,可以用来做基因的拷贝数。但是如果你的产物单一,有相应的标准品,也是可以测浓度的,浓度的准确性和你的标准曲线相关。

实时荧光定量PCR:

实时荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR,RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。检测指标是:各样品的目的基因和管家基因分别进行Realtime PCR反应。PCR产物与 DNA Ladder在2%琼脂糖凝胶电泳,GoldView染色,检测PCR产物是否为单一特异性扩增条带。

精确测定DNA浓度的方法:

DNA纯度和浓度的检测:分光光度(紫外吸收)法1.预热紫外分光光度计10-20分钟。2.取所需的比色杯(4ml),其中一只装入3 mlH2O溶液,作为空白液,用来校正分光光度计零点及调整透光度至100。3. DNA纯度及浓度的测定:①取3微升的DNA样品加入比色杯,加dH2O至3000微升,混匀。②将比色杯置入分光光度计中,调入射光波长,分别用空白溶液调整零点(T为100,OD为0),测待测样品在260nm、280nm、230nm的OD值。③计算浓度:DNA浓度(ug/ml)=A260×50ug/ml×稀释倍数对于双链DNA 1.0 OD260=50 ug/ml对于单链RNA 1.0 OD260=40 ug/ml4. 纯的DNA溶液其OD260/OD280应为1.8,OD260/OD230应大于2.0。⑴ OD260/OD280大于1.9时,说明有RNA污染,小于1.6时表明有蛋白质或酚污染。

4. 超微量分光光度仪价格

  一、需要的仪器:  各种规格的烧杯、三角瓶、量筒、移液管、洗耳球、比色管、容量瓶、移液管、称量瓶、干燥器、蒸馏水制备装置、pH计、冷凝回流装置、酸式滴定管,或选用COD测定仪产品、可控温冰柜,或选用BOD测定仪器产品、紫外、红外分光光度仪、过滤装置(漏斗、滤纸、滤膜)恒温烘箱,箱式电阻炉、坩锅。  二、污水化验室设计要求:  ①样品制备室:样品的采集准备、预处理、转移和留样储备:  ②物品储藏室:化学试剂和玻璃器皿的贮藏和保管,有毒和危险试剂的安置(配备安全柜);  ③综合理化室:基本的化验操作、普通的理化分析;  ④精密仪器室:放置精密仪器,这类仪器存放需要防电磁干扰、防震动、防噪音、防腐蚀、防尘和恒定的温湿度等,此外需要稳定的电力条件;  ⑤天平室:专业的称量工作问:  ⑥生物检验室:对环境和通风有特定的要求,负责生物学实验,无菌洁净室有标准的洁净度要求;  ⑦辅助钢瓶室:存放气体钢瓶的场所;  ⑧办公室(辅助室):数据处理、档案存放及日常事务管理及组织后勤补给等工作。人员培训上岗。具有专业技能和理论基础。

5. 超微量分光光度仪的使用

钨灯是在白炽灯里充填的惰性气体中,加入微量卤素或卤化物而制成的电光源。具有体积小、发光效率高、色温稳定、几乎无光衰、寿命长等优点。其表面温度可达200℃~300℃,使用寿命一般在(2000~3000)h。按照这一时间推断,一台分光光度计每天正常开机使用8h,其卤钨灯能使用1年多。

6. 超微量分光光度仪原理

分光光度计介绍:

分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。该仪器是食品厂、饮用水厂办理QS、HACCP认证的必备检验设备。

分光光度计原理:

分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光线透过测试的样品后,部分光线被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。

分光光度计组成:主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统组成。

分光光度定义:

分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。

常用的波长范围:

(1)200~400nm的紫外光区

(2)400~760nm的可见光区

(3)2.5~25μm(按波数计为4000cm<-1>~400cm<-1>)的红外光区

所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度,所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定,定期进行校正检定。

分光光度计的重要配件—— 比色杯

比色杯按照材质大致分为石英杯、玻璃杯以及塑料杯。根据不同的测量体积,有比色杯和毛细比色杯等。一般测试核酸和紫外定量蛋白,均采用石英杯或者玻璃杯,但是不适合比色法测定。因为反应中的染料(如考马斯亮兰)能让石英和玻璃着色,所以必须采用一次性的塑料杯。而塑料杯一般不适合用于在紫外范围内测试样品。

分光光度计操作方法:

1.接通电源,打开仪器开关,掀开样品室暗箱盖,预热10分钟。

2.将灵敏度开关调至“1”档(若零点调节器调不到“0”时,需选用较)。

3.根据所需波长转动波长选择钮。

4.将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处,用擦镜纸擦清外壁,放入样品室内,使空白管对准光路。

5.在暗箱盖开启状态下调节零点调节器,使读数盘指针指向t=0处。

6.盖上暗箱盖,调节“100”调节器,使空白管的t=100,指针稳定后逐步拉出样品滑竿,分别读出测定管的光密度值,并记录。

7.比色完毕,关上电源,取出比色皿洗净,样品室用软布或软纸擦净。

分光光度计注意事项:

1.该仪器应放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发亮不稳定。

2.使用本仪器前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理,以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前,应该对仪器的安全性能进行检查,电源接线应牢固,通电也要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再按通电源开关。

3.在仪器尚未接通电源时,电表指针必须于“0”刻线上,若不是这种情况,则可以用电表上的校正螺丝进行调节。

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